Bu öğeden alıntı yapmak, öğeye bağlanmak için bu tanımlayıcıyı kullanınız:
http://acikerisim.ktu.edu.tr/jspui/handle/123456789/3586
Başlık: | Helicoverpa armıgera'dan izole edilen serratıa marcescens bakterisine ait kitinaz A, B ve C genlerinin klonlanması, karakterizasyonu, ekspresyonu ve enzim aktivitelerinin belirlenmesi |
Diğer Başlıklar: | Characterisation, expression, and purification, of chitinase A, B and C genes isolated from serratia marcescens originating from Helicoverpa armigera and determining their enzyme activity |
Yazarlar: | Yakupoğlu, Mehtap |
Anahtar kelimeler: | Serratia marcescens, chiA, chiB, chiC, Kitinaz üretimi, Protein ekspresyonu, Enzim aktivitesi;Serratia marcescens, chiA, chiB, chiC, Chitinase production, Expression of protein, Activity of enzyme |
Yayın Tarihi: | Ağu-2009 |
Yayıncı: | Karadeniz Teknik Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü |
Özet: | Fungal hücre duvarı ve böcek dış iskeleti temel yapı bileşeni olarak kitin içerdiğinden kitinaz enzimleri hem çeşitli bitki hastalıklarına neden olan fitopatojen funguslara hem de zararlı böceklere karşı biyolojik kontrol ajanı olarak kullanılma potansiyeline sahiptirler.Bu çalışmada, doğal olarak ölmüş Helicoverpa armigera larvasından Serratia marcescens bakterisi izole edildi. Bu bakteriden kitinaz A, B ve C enzimlerini kodlayan genler ( chiA, chiB ve chiC) dejenerat primerler kullanılarak PCR ile çoğaltıldı. Çoğaltılan genlerin nükleotid dizilimini belirlemek için PCR ürünleri pGEM-T Easy klonlama vektörüne klonlandı ve dizin analizine gönderildi. Dizin analizi yapılan kitinaz A, B ve C genlerinin DNA ve aminoasit sıraları literatürdeki mevcut kitinaz genlerinin DNA ve aminoasit sıraları ile karşılaştırıldı.Analiz sonuçları bu çalışmada izole edilmiş S. marcescens bakterisine ait kitinaz A geninin literatürde ki S.marcescens (BJL200) chiA genine %99, kitinaz B'nin literatürde ki S.marcescens (BJL200) chiB genine %97 ve kitinaz C'nin ise literatürde ki S. marcescens chiC1 genine %96 oranında benzer olduğunu gösterdi. Dizin analizi yapılan bu kitinaz genleri pET-28a(+) ekspresyon vektörüne klonlanarak Escherichia coli'de proteinleri ekspres edildi. Ekspres edilen proteinler saflaştırılarak, SDS-PAGE analizine tabi tutuldular. Bu analiz sonucunda kitinaz A genine ait 57kDa'luk, kitinaz B genine ait 53kDa'luk ve kitinaz C genine ait 50kDa'luk protein bantları jel üzerinde belirlendi.Elde edilen enzimlerin en iyi çalıştığı pH ve sıcaklık aralıklarına bakıldı. Buna göre; kitinaz B'nin en iyi pH 9 ve 35oC sıcaklıkta, kitinaz C'nin ise pH 8,5 ve 33 oC sıcaklıkta aktivite gösterdiği belirlendi. |
URI: | http://acikerisim.ktu.edu.tr/jspui/handle/123456789/3586 |
Koleksiyonlarda Görünür: | Biyoloji |
Bu öğenin dosyaları:
Dosya | Açıklama | Boyut | Biçim | |
---|---|---|---|---|
244526.pdf | 573.92 kB | Adobe PDF | ![]() Göster/Aç |
DSpace'deki bütün öğeler, aksi belirtilmedikçe, tüm hakları saklı tutulmak şartıyla telif hakkı ile korunmaktadır.