Lab-On-a-Chip içerisinde insan-immünoglobulin G tayini

Abstract

Bu çalışmada Lab-On-a-Chip (LOC) üzerinde mikro akışkanlar kullanılarak, elektrokimyasal yollarla dolaylı olarak insan immünoglobulin-G (H-IgG) tayini yapıldı. LOC fabrikasyonu için Siklik Olefin Kopolimer (COC) zemin üzerine screen printed elektrot (SPE) basıldı. Süper mıknatısların yerleştirileceği yeri ve mikroakışkanların geçeceği kanalı oluşturmak üzere Poli(dimetilsiloksan) (PDMS) kullanıldı. Fabrikasyonu yapılan LOC kanalında, üzerine önceden keçi vücudunda üretilmiş Anti-H-IgG antikor inkübe edilmiş manyetik parçacıklardan oluşan ve süper mıknatıslarla sabitlenen bir dolgu oluşturuldu. Oluşturulan dolgu malzemesi optimize edildikten sonra, kanaldan farklı konsantrasyonlarda İnsan-İmmünoglobulin G (H-IgG) geçirilerek dolgu malzemesince tutturuldu. İnkübe edilen H-IgG'lerin tayini için kanaldan Quantum noktaları ile inkübe edilmiş, biyotinli, keçiden elde edilen Anti-H-IgG antikor geçirildi. Kuantum noktalarının yapısında bulunan Cd2+, asetat tampon (pH 3,0) çözeltisiyle çözülerek elektrot üzerine yollanırken kare dalga voltametrisi yöntemiyle kadmiyum tayini üzerinden H-IgG tayin edildi. In this study Human-Immunoglobulin G (H-IgG ) was detected on Lab-On-a-Chip (LOC) by using microfluidics and electrochemical detection techniques. Screen printed electrodes were printed on Cyclic Olefin Copolymer (COC) for fabrication of LOC. PDMS (Poly(dimethylsiloxane)) was used to place supermagnets and to fabricate the channel for the flow of microfluidics. Inside the LOC microchannel, a plug formed with magnetic beads, which were incubated initially with Anti-HIgG antibodies (produced on goat) by the supermagnets. After optimization of the plug, different concentrations of HIgG were introduced to channel and were captured by the plug. To obtain complete immunoassay, biotinated Anti-HIgG's, which were incubated with quantum dots were introduced to the channel. HIgG was detected in an indirect way via detection of Cd2+ associated with quantum dots, which were dissolved in acetate buffer (pH 3.0) and detected by square wave voltametry.