Cydia pomonella granulozis virüs (CpGV)'ün cydia molesta'da transkripsiyonal analizi

Abstract

Doğu meyve güvesi Cydia molesta (Lepidoptera: Tortricidae), son zamanlarda, Çin, Asya, Avrupa ve Avustralya gibi ülkelerde sert çekirdekli meyvecilik alanlarında önemli bir zararlı haline gelmiştir. Zararlı larvaları, Rosaceae familyası içinde bulunan şeftali, elma, erik gibi meyvelere büyük hasarlar vermektedir. C. molesta aynı zamanda C. pomonella ile yakından ilişkili bir tür olduğundan, elma bahçelerinde de büyük zararlara neden olmaktadır. Baculoviridae üyesi olan C. pomonella granülovirüsünün (CpGV) C. pomonella?ya karşı yüksek bir spesifitesi olduğu bilinmektedir. CpGV, dünyada C. pomonella?ya karşı kullanılan en önemli biyolojik mücadele etmenidir. C. pomonella ile C. molesta yakından ilişkili türler olmasına rağmen, CpGV?nın ticari izolatı olan CpGV-M?nin C. molesta üzerinde enfeksiyon başarısı yüksek değildir. Yakın zamanda izole edilen ve V22 olarak adlandırılan CpGV izolatının C. molesta üzerinde etkinliğinin yüksek olduğu gösterilmiştir. CpGV-V22, CpGVgenotiplerinin bir karışımıdır. Ticari CpGV-M?nin C. molesta üzerindeki enfeksiyon sürecinin daha iyi anlaşılabilmesi için, C. molesta ve C. pomonella üzerinde karşılaştırmalı transkriptom analizleri yapıldı. CpGV-M?nin seçilmiş genlerinin (granulin, actin, ie-1, lef-8, mcp, f-protein) transkriptsiyonu reverse transkripsiyon PCR (RT-PCR) yöntemiyle analiz edildi. CpGV-M ile enfekte C. molesta ve C. pomonella larvalarından yapılan RT-PCR sonuçlarına göre, CpGV-M C. pomonella?da transkript olurken, C. molesta?da transkript olmadığı belirlendi. Bu nedenle, farklı bir granulozis virus izolatının (V22), C. molesta?daki traskripsiyon analizlerinin yapılabilmesi için bu izolat karışık genotiplerden oluşan granulozis viruslerin stoğundan (CpGV-V22) in vivo klonlama yöntemiyle saflaştırıldı.